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  • 植物組織果糖含量測試盒 糖代謝
  • 植物組織果糖含量測試盒 糖代謝
產(chǎn)品名稱:

植物組織果糖含量測試盒 糖代謝

產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價格:
廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時間: 2024-07-09
儲存條件
2-8℃
中文名稱
植物組織果糖含量測試盒 糖代謝
有效期
6個月
單位

英文名稱
Plant Tissue Fructose Content Assay Kit
檢測方法
可見分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/48S

產(chǎn)品概述

品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
分子式詳詢純度詳詢
分子量詳詢貨號BC2450
規(guī)格50管/48樣供貨周期現(xiàn)貨
主要用途植物組織果糖含量測定應用領域環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合

酰基轉(zhuǎn)移酶(AAT)活性檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
注意:本產(chǎn)品試劑有所變動,請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號:BC2350
規(guī)格:10T/9S
產(chǎn)品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱規(guī)格保存條件
提取液液體15 mL×1瓶2-8℃保存
試劑一液體10 mL×1瓶2-8℃保存
試劑二粉劑×1-20℃保存
試劑三液體1.5 mL×1支2-8℃保存
試劑四液體1mL×1支2-8℃保存
溶液的配制:
  1. 提取液:內(nèi)含不溶物,使用前搖勻;

  2. 試劑二:臨用前加蒸餾水1mL充分溶解,未用完的試劑2-8℃可以保存2

產(chǎn)品說明:
AAT是一個多功能蛋白大家族,主要負責催化生物體內(nèi)各種酰基化和去?;磻?,在基因表達、代謝和信號傳導中具有重要作用。

AAT催化乙酰CoA轉(zhuǎn)移乙?;蕉〈?,同時還原DTNB生成TNB;TNB412nm有吸收峰,測定412nm吸光度增加速率,來計算AAT活性。
注意:實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟:
一、樣本處理(可適當調(diào)整待測樣本量,具體比例可以參考文獻)
1、組織樣本:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行浴勻漿。4℃,15000 g離心20min,取上清液待測
2、血清(漿)樣本:直接檢測。(若液體有渾濁則離心后進行測定)
二、測定步驟
  1. 分光光度計預熱30min 以上,調(diào)節(jié)波長至412nm,蒸餾水調(diào)零。

  2. 試劑一在37℃水浴保溫20min以上。

  3. 樣本測定:

 
試劑名稱(μL空白管測定管
蒸餾水100-
上清液-100
試劑一(預熱)700700
試劑二5050
試劑三100100
試劑四5050
將上述試劑按順序加入1mL 玻璃比色皿中,加試劑四的同時開始計時,充分吹打混勻,在412nm波長下記錄10s時的初始吸光度A1130s后的吸光值A2,計算ΔA=A2-A1空、ΔA=A2-A1測、ΔA=ΔA-ΔA空。空白只需做1-2次。
三、AAT活性計算
1、按樣本蛋白濃度計算
單位的定義:37℃中每mL反應體系下每毫克蛋白每分鐘催化吸光值變化0.001個單位為1個酶活單位。
AAT (U/mg prot) =ΔA÷0.001÷(Cpr×V樣) ÷T= 5000×ΔA÷Cpr
此法需要自行測定樣本蛋白質(zhì)濃度。
2、按樣本質(zhì)量計算
單位的定義:37℃中每mL反應體系下每克組織每分鐘催化吸光值變化0.001個單位為1個酶活單位。
AAT (U/g 質(zhì)量) =ΔA÷0.001÷(V÷V樣總×W) ÷T=5000×ΔA÷W
3、按血清體積計算
單位的定義:37℃中每mL反應體系下每mL血清每分鐘催化吸光值變化0.001個單位為1個酶活單位。
AAT (U/mL 血清) =ΔA÷0.001÷V÷T=5000×ΔA
Cpr:上清液蛋白濃度,mg/mL,需要另外測定;V樣:加入反應體系中上清液體積,0.1mL;W:樣本質(zhì)量,g;V樣總:提取液體積,1mL;T:反應時間,2min。
注意事項:
  1. 當吸光值大于1時,建議稀釋后測量。

  2. 如果ΔA小于0.01,可以延長反應時間,如測定10s310s的吸光度,計算時相應修改計算公式中反應時間。

實驗實例:
  1. 取0.1g腎臟加入1mL提取液進行樣本處理,取上清后稀釋4倍后按測定步驟操作,測得ΔA=A2-A1=0.105-0.101=0.004ΔA=A2-A1=0.665-0.479=0.186、ΔA=ΔA-ΔA=0.186-0.004=0.182,按樣本質(zhì)量計算酶活得:AAT (U/g 質(zhì)量) =5000×ΔA÷W×4(稀釋倍數(shù))=36400 U/g 質(zhì)量。

  2. 取兔血清直接按照測定步驟操作,測得ΔA=A2-A1=0.105-0.101=0.004ΔA=A2-A10.622-0.521=0.101、ΔA=ΔA-ΔA=0.101-0.004=0.097,按血清體積計算酶活得:AAT (U/mL 血清) =5000×ΔA=5000×0.097=485 U/mL 血清。

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