濾紙酶（FPA）活性檢測試
劑盒說明書
可見分光光度法
貨號：BC2650
規(guī)格：50T/24S
產(chǎn)品內(nèi)容：使用前請認真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 濾紙條：常溫防潮保存。

2. 標準品：10mg無水*萄糖。臨用前加入1 mL蒸餾水溶解，配成10 mg/mL葡萄糖溶液備用，2-8℃保存兩周。

產(chǎn)品說明：
纖維素酶是降解纖維素生成葡萄糖一類酶的總稱，它不是單體酶，而是起協(xié)同作用的多組分酶系。以不溶性纖維素如濾紙為底物測定的纖維素酶稱為濾紙酶，研究濾紙酶活力對纖維素酶總體酶活力的研究的有著重要意義。

FPA水解濾紙產(chǎn)生還原糖，還原糖與3,5 -二硝基水楊酸反應生成在540 nm有特征吸收峰的棕紅色物質(zhì)，通過測定540 nm處吸光值變化可計算得FPA活性。


注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計、臺式低溫離心機、水浴鍋、1 mL玻璃比色皿、超聲破碎儀、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水、EP管（2 mL）。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
注意事項：

1. 用干凈的鑷子取出濾紙條，帶手套將濾紙條卷成小卷放入EP管底部。

2. 當A或ΔA超過1.2時，建議將樣本用蒸餾水稀釋后再進行測定，計算公式中乘以稀釋倍數(shù)。

3. 顯色結(jié)束吸取檢測液時注意槍頭不要碰到濾紙條，以免帶入毛狀物，影響測定結(jié)果。

實驗實例：

1. 取0.1g平菇傘部加入1mL蒸餾水，冰浴勻漿后于4℃，12000 rpm離心10 min，取上清置于冰上待測。之后按照測定步驟操作，測得計算ΔA測定=A測定管-A對照管=0.668-0.425=0.243，帶入標準曲線y=1.6716x-0.2189，計算x=0.2763，按樣本質(zhì)量計算酶活得：

FPA酶活（U/g 質(zhì)量）=x×V提取÷W÷T=0.0333x÷W=0.092 U/g 質(zhì)量。
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