品牌 | SOLARBIO/索萊寶 | 貨號 | BC2310 |
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規(guī)格 | 50管/48樣 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
主要用途 | 胰蛋白酶活性測定 |
胰蛋白酶測試盒
貨號:BC2310
規(guī)格:50管/48樣
檢測方法:可見分光光度法
測定意義:
胰蛋白酶選擇性水解變性蛋白質(zhì)中由賴氨酸或精氨酸的羧基所構成的肽鏈,是一種重要的消化酶。此外,胰蛋白酶還廣泛應用于膿胸、血胸、外科炎癥、潰瘍、創(chuàng)傷性損傷等所產(chǎn)生的局部水腫、血腫及膿腫等的輔助治療。
測定原理:
胰蛋白酶催化水解BAEE的酯鍵,生成BA,BA在253nm處有吸收峰,通過測定253nm 吸光度增加速率,即可計算出胰蛋白酶的活性。
自備儀器和用品:
紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、研缽、冰和蒸餾水。
一、 粗酶液提取:
稱取約 0.1g 樣品,加入 1mL 提取液進行冰浴勻漿,10000 rpm 4℃離心 10min,取上清液,即粗酶液,置冰上待測?;蛘咧苯臃Q取 1mg 酶粉,加 1mL 提取液,充分混勻后置冰上待測(為保證實驗的準確性建議梯度稀釋)。
二、 測定:
1. 分光光度計預熱 30 min 以上,調(diào)節(jié)波長到 253 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 工作液的配制:將試劑一與試劑二按 2:97 配置工作液,按需配制,并置于 37℃水浴預熱 30min以上。
3. 空白管:取 1mL 石英比色皿,加入 990µL 工作液,再加入 10μL 蒸餾水,混勻,迅速于 253nm測定 0s 和 60s 的吸光度,記為△A 空白。
4. 測定管:取 1mL 石英比色皿,加入 990µL 工作液,再加入 10μL 粗酶液,混勻,迅速于 253nm測定 0s 和 60s 的吸光度,記為△A 測定。
三、 胰蛋白酶活性計算:
1.按蛋白濃度計算:
活性單位(U)定義:在 1mL 體系下,37℃每毫克蛋白質(zhì)每分鐘催化 253nm 處吸光值增加 0.001 為一個單位。
胰蛋白酶(U/mg prot)= (△A 測定-△A 空白) ÷0.001÷(Cpr×V1)÷T
=100000×(△A 測定-△A 空白) ÷Cpr2.按樣本鮮重計算:
活性單位(U)定義:在 1mL 體系下,37℃每克組織每分鐘催化 253nm 處吸光值增加 0.001 為一個單位。
胰蛋白酶(U/mg prot)= (△A 測定-△A 空白) ÷0.001÷(W×V1÷V2)÷T
=100000×(△A 測定-△A 空白) ÷W
Cpr:粗酶液蛋白質(zhì)濃度(mg/mL),需要另外測定;W:組織質(zhì)量(g);V1:加入反應體系中粗酶液體積(mL),10μL=0.01 mL;V2:粗酶液總體積(mL),1 mL;T:反應時間(min),1min。
實驗前用 1~2 個樣做預實驗,保證吸光值變化在 0.01~0. 15 之間。
胰蛋白酶測試盒訂購說明:
1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,一般情況下都能訂貨當日發(fā)貨。
2、部分非常用產(chǎn)品,需提前1-2日預訂,海外期貨則需要提前3-6周預訂。
3、部分產(chǎn)品價格會因貨期、批次等因素發(fā)生變化,若有變動以訂貨當日新價格為準。
4、每日訂單截止時間為16點整,部分城市可到17點整,因超過截止時間造成當日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
5、請辦理完貨款后,將底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。
運輸說明:
1、極低溫產(chǎn)品:極低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝干冰運輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來,再用泡沫盒密封,膠帶層層粘住泡沫盒,放入索萊寶的箱子,然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實驗保駕護航。
2、低溫產(chǎn)品:低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來,再使用泡沫盒密封,用膠帶嚴實密封泡沫盒,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續(xù)一周),然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實驗保駕護航。
3、常溫產(chǎn)品:常溫產(chǎn)品運輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產(chǎn)品由公司庫房人員快速配貨,準確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達您的手中。