品牌 | SOLARBIO/索萊寶 | CAS | 詳詢 |
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分子式 | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
分子量 | 詳詢 | 貨號(hào) | BC1965 |
規(guī)格 | 100T/48S | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
主要用途 | 測(cè)定意義:漆酶(Laccase)是一種含銅的多酚氧化酶,屬于銅藍(lán)氧化酶家族,廣泛 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合 |
土壤漆酶
活性檢測(cè)試劑盒說明書
微量法
注意:本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng),請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。
貨號(hào):BC1965
規(guī)格:100T/48S
產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
試劑一 | 液體30 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑二 | 粉劑×2瓶 | 2-8℃保存 |
試劑三 | 液體3 mL×1瓶 | 常溫保存 |
溶液的配制:
試劑二:臨用前取1瓶加7.5 mL試劑一溶解,現(xiàn)用現(xiàn)配,并且盡快使用,用不完的試劑2-8℃可保存一周;若試劑變色則不能使用。
試劑三:若有白色物質(zhì)析出,放于37℃中溶解即可。
產(chǎn)品說明:
土壤漆酶(SL)是一種含銅的多酚氧化酶,屬于銅藍(lán)氧化酶家族,廣泛分布于真菌和高等植物中,具有較強(qiáng)的氧化還原能力,在紙漿生物漂白,環(huán)境污染物降解和木質(zhì)纖維素降解以及生物檢測(cè)方面有非常廣泛的應(yīng)用。
漆酶分解底物ABTS產(chǎn)生ABTS自由基,在420nm處的吸光系數(shù)遠(yuǎn)大于底物ABTS,測(cè)定ABTS自由基的增加速率,可計(jì)算得漆酶活性。
注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、天平、低溫離心機(jī)、恒溫培養(yǎng)箱/水浴鍋、可調(diào)式移液器、震蕩儀、研缽、30-50目篩。
操作步驟:具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn))
新鮮土樣自然風(fēng)干或37℃烘箱風(fēng)干,過30~50目篩。
二、測(cè)定步驟
分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到420nm,分光光度計(jì)蒸餾水調(diào)零。
加樣表:
試劑名稱 | 測(cè)定管 | 對(duì)照管 |
土樣(g) | 0.03 | 0.03 |
試劑一(μL) | 135 | 135 |
試劑二(μL) | 150 | - |
置于37℃水浴鍋或37℃恒溫培養(yǎng)箱準(zhǔn)確反應(yīng)10min。 | ||
試劑三(μL) | 15 | 15 |
試劑二(μL) | - | 150 |
4℃,12000g 離心15min,取200μL上清于420nm測(cè)定其吸光值,分別記為A測(cè)定管、A對(duì)照管,計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定管-A對(duì)照管。每個(gè)測(cè)定管需設(shè)一個(gè)對(duì)照管。 |
注意事項(xiàng):
測(cè)定之前進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn),若吸光值較高(A>1.5),請(qǐng)減少土樣質(zhì)量再進(jìn)行測(cè)定。若數(shù)值偏小可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間或增加土樣質(zhì)量進(jìn)行測(cè)定。計(jì)算時(shí)注意相對(duì)應(yīng)修改計(jì)算公式。
離心后若上清仍然渾濁,可再次離心去除。
實(shí)驗(yàn)實(shí)例:
稱取兩份0.03g三葉草土于1.5mLEP管中,分別為測(cè)定管及對(duì)照管,之后按照測(cè)定步驟操作,用96孔板測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定管-A對(duì)照管=0.421-0.23=0.191,按土樣質(zhì)量計(jì)算酶活得:
SL活性(U/g土樣)=1.39×ΔA測(cè)定÷W= 1.39×0.191÷0.03=8.84 U/g 土樣。
稱取兩份0.03g林土樣于1.5mLEP管中,分別為測(cè)定管及對(duì)照管,之后按照測(cè)定步驟操作,用96孔板測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定管-A對(duì)照管=1.009-0.463=0.546,按土樣質(zhì)量計(jì)算酶活得:
SL活性(U/g土樣)=1.39×ΔA測(cè)定÷W= 1.39×0.546÷0.03=25.30 U/g 土樣。
相關(guān)系列產(chǎn)品:
BC0110/BC0115 土壤多酚氧化酶(S-PPO)活性檢測(cè)試劑盒
BC0120/BC0125 土壤脲酶(S-UE)活性檢測(cè)試劑盒
BC0240/BC0245 土壤蔗糖酶(S-SC)活性檢測(cè)試劑盒
土壤漆酶檢測(cè)試劑盒 微量法 土壤漆酶檢測(cè)試劑盒 微量法