品牌 | SOLARBIO/索萊寶 |
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基因工程試劑 快速連接試劑盒
貨號(hào):QL0010
規(guī)格:20T
保存 :-20℃保存。
產(chǎn)品內(nèi)容:
T4 DNALigase 20ul(4U/ul)
2×Quick Ligation Buffer 200ul
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
本試劑盒所帶 T4 DNA Ligase 能催化 dsDNA、 dsRNA 或 DNA/RNA 的 5’-磷酸末端和 3’-羥基末端形成磷酸二酯鍵。該酶不僅能催化平滑末端或粘性末端 DNA 之間的連接,還可以修復(fù)雙鏈 DNA、RNA 或 DNA/RNA雜交雙鏈中的單鏈切口,在 Solarbio 公司特制的 2×Quick Ligation Buffer 中,室溫(25℃)下反應(yīng) 5 分鐘即可完成連接反應(yīng),反應(yīng)液可直接用于轉(zhuǎn)化,使用方便、快捷,極大地縮短了試驗(yàn)時(shí)間。本試劑盒可應(yīng)用于 DNA片段克隆入載體、文庫構(gòu)建、TA 克隆、Linker 連接以及線性 DNA 的再環(huán)化等試驗(yàn)。
單位定義:
在 2ul 連接反應(yīng)體系、0.12uM(300ug/ml)的 5’-末端濃度條件下,16℃反應(yīng) 30 分鐘,能使 50﹪Hind III消化的λDNA 片段連接上所需的酶量定義為一個(gè)活性單位。
使用方法:
1、按下面配制反應(yīng)體系
2×Quick Ligation Buffer 10ul
載體 50ng
插入片段 50-150ng
T4 DNA Ligase 1ul
dd H2O up to 20ul
2、室溫下反應(yīng) 5 分鐘,反應(yīng)產(chǎn)物冰上冷卻,然后直接用于轉(zhuǎn)化或凍存于-20℃。注意不要熱失活,熱失活會(huì)急劇降低轉(zhuǎn)化效率。當(dāng)插入片段超過 1.5kb 時(shí),延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間 15-30 分鐘。
注意事項(xiàng):
1 、2×Quick Ligation Buffer 用前應(yīng)*混勻,避免反復(fù)凍融,可適當(dāng)分裝成小份以保證質(zhì)量。
2、為保證有效連接,總的載體 DNA 與插入片段的總濃度應(yīng)在 1-10ug 之間。對(duì)單插入來說,插入片段:載體
比例在 1:2-1:6 之間好,低于 2:1 會(huì)降低連接效率,高于 6:1 會(huì)產(chǎn)生重復(fù)插入。
3、如果是做電轉(zhuǎn)化,請(qǐng)將連接產(chǎn)物純化后再進(jìn)行電轉(zhuǎn)化。
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基因工程試劑 快速連接試劑盒訂購說明:
1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。
2、部分非常用產(chǎn)品,需提前1-2日預(yù)訂,海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。
3、部分產(chǎn)品價(jià)格會(huì)因貨期、批次等因素發(fā)生變化,若有變動(dòng)以訂貨當(dāng)日新價(jià)格為準(zhǔn)。
4、每日訂單截止時(shí)間為16點(diǎn)整,部分城市可到17點(diǎn)整,因超過截止時(shí)間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
5、請(qǐng)辦理完貨款后,將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。
運(yùn)輸說明:
1、極低溫產(chǎn)品:極低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過程中加裝干冰運(yùn)輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來,再用泡沫盒密封,膠帶層層粘住泡沫盒,放入索萊寶的箱子,然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
2、低溫產(chǎn)品:低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過程中加裝索萊寶冰袋運(yùn)輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來,再使用泡沫盒密封,用膠帶嚴(yán)實(shí)密封泡沫盒,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續(xù)一周),然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
3、常溫產(chǎn)品:常溫產(chǎn)品運(yùn)輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產(chǎn)品由公司庫房人員快速配貨,準(zhǔn)確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達(dá)您的手中。