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木瓜蛋白酶的提取方法

發(fā)布日期: 2016-04-16
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木瓜蛋白酶(Papain)簡(jiǎn)稱木瓜酶,又稱為木瓜酵素。是利用未成熟的番木瓜(Carica papaya)果實(shí)中的乳汁,采用現(xiàn)代生物工程技術(shù)提煉而成的生物酶制品。木瓜蛋白酶主要作用:食品加工、醫(yī)藥使用、日化洗滌、飼料加工、皮革 和紡織等行業(yè);以未成熟的番木瓜乳液為原料,經(jīng)過生物提取、微濾、冷凍、干燥提煉而成的酶制劑。
木瓜蛋白酶的提取方法:(僅供參考)
由木瓜的未成熟果實(shí),經(jīng)提取乳液、凝固、沉降、干燥而成粗制品。一般工業(yè)上以粗制品的應(yīng)用為主。木瓜蛋白酶韻生產(chǎn)方法有三種,分別是直接熱風(fēng)烘干法、噴霧干燥法及膜分離凍干法。
直接烘干
生產(chǎn)方法較簡(jiǎn)單、快速,但生產(chǎn)出來的成品只是粗酶,雜質(zhì)多、色澤差且微生物超標(biāo),酶活力也較低,只有60萬~80萬單位/g。多為個(gè)體工廠采用,已不能滿足國內(nèi)食品質(zhì)量衛(wèi)生安全等。
噴霧干燥
此法是先通過離心去除部分雜質(zhì)后再進(jìn)行噴霧干燥,所生產(chǎn)出的成品酶活力相對(duì)高,達(dá)到100萬單位/g左右,雜質(zhì)相對(duì)也較少,色澤相對(duì)也較白。但產(chǎn)品噴霧時(shí)容易粘壁,酶活損失較大,水溶性相對(duì)也較差,而且酶活穩(wěn)定性也較差。
膜分離法
該生產(chǎn)方法不但避免了以上兩種方法的缺點(diǎn),且生產(chǎn)過程衛(wèi)生安全,收率也高,所生產(chǎn)的成品酶活損失小,酶活力一般可達(dá)到280萬~350萬單位/g,高可達(dá)400萬單位/g,且酶活穩(wěn)定性好,純度高,色澤潔白,細(xì)菌數(shù)低,嚴(yán)格操作可達(dá)到醫(yī)藥。
其提取工藝條件為超聲波功率300W,超聲處理時(shí)間200s,果漿質(zhì)量分?jǐn)?shù)30%;經(jīng)超聲波強(qiáng)化提取,酶活力提高到原先的1.71倍;該酶在40℃以下,pH為5.4~6.0時(shí)酶活力相對(duì)穩(wěn)定;EDTA、Cys和維生素C對(duì)酶活力具有激活作用,CuS04和ZnCl2具有抑制作用,而KCl、NaCI、CaCl2、MgS04對(duì)酶活力的影響不大。
木瓜蛋白酶的分離純化工藝:采用初步采集處理,20%、40%硫酸銨分級(jí)沉淀、SP-sephadexC50柱色譜、羥基磷灰石柱色譜,從番木瓜乳汁中分離純化木瓜蛋白酶??色@得比活為1184U/mg的純酶,活力回收率為55.79%,純度達(dá)到99.31%,為高純度的木瓜蛋白酶。
北京索萊寶科技有限公司是一家集產(chǎn)品研發(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務(wù)于一體的高科技生物企業(yè)。產(chǎn)品主要涵蓋生化試劑、分子生物學(xué)試劑、細(xì)胞培養(yǎng)、免疫學(xué)產(chǎn)品及實(shí)驗(yàn)耗材等。木瓜蛋白酶為索萊寶自產(chǎn)產(chǎn)品,其貨號(hào)為G8430。木瓜蛋白酶為乳白色微黃色粉末,具有木瓜*的氣味,稍具有吸濕性。水解蛋白質(zhì)能力強(qiáng),但幾乎不能分解蛋白胨,易溶于水,甘油,不溶于一般的有機(jī)溶劑,耐熱性強(qiáng)。

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