DAB顯色試劑盒（20×）說明書

貨號：DA1010

規(guī)格：        

保存：   -20℃避光密閉保存，一年有效，避免反復凍融；短期可2-8℃保存。產品簡介：   二氨基聯苯胺（Diaminobenzidine,DAB）是過氧化物酶（POD）的顯色底物，DAB顯色液主要用于免疫過氧化物酶法，適用于辣根過氧化物酶HRP標記的免疫印記或免疫組化反應。過氧化物酶催化底物發(fā)生反應，于反應部位產生棕色沉淀物，免疫印記可直接在膜上顯示條帶；免疫組化標本顯色時間一般為室溫5-20分鐘，隨后在顯微鏡下觀察顯色情況，顯色充分后應將標本及時脫水封固，其終產物可直接在光鏡下觀察，也可經OsO4處理后，增加反應產物的電子密度，用于電鏡觀察。操作說明：

• 對于組織切片或蛋白質印記膜，在與辣根過氧化物酶（HRP）標記的抗體或其它形式的探針孵育后，用適當洗滌液洗滌3-5次，每次3-5分鐘。
• 取900μl PBS（或雙蒸水），加入50μl 溶液A，50μl 溶液B混合均勻，即配成DAB工作液。

如需要更大體積工作液，可按比例放大。此溶液必須現用現配，配好后避光保存，1小時內使用，過期后請將剩余的液體廢棄。

• 向組織切片或印記膜上加入適量DAB工作液，確保能充分覆蓋樣品。
• 室溫避光孵育3-10 分鐘或更長時間，避免光照，直顯色預期深淺。
• 去除DAB染色工作液，用蒸餾水洗滌2-3次即可終止顯色反應。
• 對于組織切片或細胞樣品，顯色反應終止后，可對其進行其他染料復染。對于膜，顯色反應終止后，可以室溫晾干避光保存。

注意事項：

• DAB溶液應低溫密封保存。如有結晶析出，應確保結晶*溶解再行使用。
• 顯色工作液應現用現配，新鮮配制的工作液應為無色或淺棕色，如顏色過深，請勿使用。
• 顯色時間嚴格控制，根據情況調整，以免顯色過度。固相膜顯色數小時后即會褪色，不能*存在。
• DAB為可疑致癌物，請采取必要的防范措施。操作時應戴手套，盡量避免與皮膚接觸，用后及時*沖洗，接觸DAB的實驗用品好經洗液浸泡24h后使用。

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