紅細(xì)胞裂解液裂解是一種比較溫和的紅細(xì)胞去除方法,它能既不損傷有核細(xì)胞又能充分的去除紅細(xì)胞。那么紅細(xì)胞裂解液的原理是怎么樣的呢?
裂解液作用原理
血紅細(xì)胞表面上有紅細(xì)胞專屬的表面抗原,當(dāng)裂解液中含可以攻擊特定紅細(xì)胞表面抗原的酶的時候就只會造成紅細(xì)胞的變形,生物通道擴(kuò)大膨脹裂解,或者引起紅細(xì)胞的變形,而不會攻擊其他細(xì)胞;另外紅細(xì)胞有自己的電負(fù)性,滲透脆性(通常是一些非酶細(xì)胞裂解液的突破點(diǎn)),懸浮穩(wěn)定性,這都是區(qū)別于其他種類細(xì)胞的區(qū)別點(diǎn)。紅細(xì)胞裂解液就是利用這些特性裂解紅細(xì)胞的。另外紅細(xì)胞裂解液不能達(dá)到100%準(zhǔn)確的裂解紅細(xì)胞,總會或多或少導(dǎo)致其他種類細(xì)胞的裂解。
裂解液配制方法
紅細(xì)胞裂解液可以自己動手配制,也可以購買公司成品。索萊寶提供成品紅細(xì)胞裂解液出售。價格合理,質(zhì)量穩(wěn)定,歡迎選購。
紅細(xì)胞裂解液是一種去除紅細(xì)胞簡便易行的方法。下面詳細(xì)介紹紅細(xì)胞裂解液配制方法和步驟。先列出配制紅細(xì)胞裂解液所需的材料:
配置所需材料
1. Ammonium Chloride 10x Lysing Concentrate Solution
a) NH4Cl 80 g
b) KHCO3 10 g
c) Na2EDTA 3.7 g
d) Distilled H2O 1000 mL
2. 1N HCl or 1N NaOH(調(diào)節(jié)pH值用)
配置步驟
1. 將以上a、b、c試劑溶于900ml 去離子水中;
2. 加去離子水定容到1000ml,調(diào)節(jié)溶液pH值到7.2-7.4,用0.22um的濾器過濾,2-8°C保存?zhèn)溆?/span>;
3. 在制備工作液時,將此儲存液稀釋10倍后使用。
保存方法
1. 10x 儲存液儲存于2-8°C不能超過半年(六個月);
2. 使用時根據(jù)需要稀釋,每次用都應(yīng)用去離子水新鮮配制工作液,當(dāng)日用不完的可廢棄。