人抗胰蛋白酶elisa試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中重組胰蛋白酶水平。用純化的重組胰蛋白酶抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入重豬胰蛋白酶,再與HRP標(biāo)記的重豬胰蛋白酶抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。
ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。
TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色。顏色的深淺和樣品中的重組豬胰蛋白酶呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中重組胰蛋白酶濃度。
人抗胰蛋白酶elisa試劑盒特點(diǎn):
1、精心篩選配對抗體:雙抗體夾心法,捕獲抗體和檢測抗體,要通過嚴(yán)格的篩選,再進(jìn)行科學(xué)的濃度調(diào)配
2、可靠的特異性:通過精心選擇抗體對,優(yōu)化緩沖液,來保證消除基質(zhì)效應(yīng),只識(shí)別目標(biāo)分析物。
3、樣本類型經(jīng)過驗(yàn)證:可檢測血清、血漿、培養(yǎng)上清等多種樣本
進(jìn)行檢測時(shí),樣品中的受檢物質(zhì)(抗原或抗體)與固定的抗體或抗原結(jié)合。通過洗板除去非結(jié)合物,再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,此時(shí),能固定下來的酶量與樣品中被檢物質(zhì)的量相關(guān)。