四環(huán)素類(lèi)抗生素的測(cè)定方法主要包括微生物抑制法、酶聯(lián)免疫法、分光光度法、毛細(xì)管電泳色譜法、薄層色譜法、高效液相色譜法、液相色譜-質(zhì)譜法等。
樣品經(jīng)過(guò)提取和凈化后,四環(huán)素類(lèi)抗生素可通過(guò)薄層色譜或液相色譜進(jìn)行分離,再采用分光光度、熒光或質(zhì)譜檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行定量測(cè)定。
微生物法是一種傳統(tǒng)的測(cè)定四環(huán)素類(lèi)化合物和其他抗生素的分析方法。微生物通常對(duì)四環(huán)素類(lèi)抗生素具有固有的敏感性。操作簡(jiǎn)便,價(jià)格低廉,不需要精密儀器和復(fù)雜的樣品前處理過(guò)程,因而適合大量樣品的篩選。
間接酶聯(lián)免疫法可用來(lái)檢測(cè)牛奶中的四環(huán)素類(lèi)抗生素。檢測(cè)限可達(dá)5 ng/g由于該方法所采用抗體與金霉素有強(qiáng)烈的交叉反應(yīng)活性,因此,該法雖然不是用來(lái)檢測(cè)四環(huán)素類(lèi)的,但對(duì)于金霉素的檢測(cè)限也低達(dá)5 ng/g。